Markierungsfreie In-L?sung-Analyseverfahren werden für die direkte Untersuchung nativer Moleküle angewendet. Sie generieren biologisch relevante Daten, die die Aufkl?rung molekularer Wechselwirkungen erm?glichen, ohne künstliche Sonden oder Markierungen zu verwenden. Dies ist ein entscheidender Vorteil, da Markierungen die h?here Ordnungsstruktur st?ren k?nnen, die für die Bindung entscheidend ist, sowie zu Artefakten in den Daten führen und sogar das zu untersuchende Molekül inaktivieren oder destabilisieren k?nnen.

Die Mikrokalorimetrie ist ein leistungsf?higes und bew?hrtes markierungsfreies In-L?sung-Analyseverfahren. Mikrokalorimeter dienen zum Nachweis der Assoziation und Dissoziation molekularer Komplexe durch Messung von ?nderungen der aufgenommenen oder abgegebenen W?rme. Die resultierenden umfangreichen Daten geben Aufschluss über die biologischen Prozesse und die Mechanismen der molekularen Wechselwirkungen. Markierungsfreie Verfahren sind für Forscher in verschiedensten Anwendungsbereichen interessant. Hierzu geh?ren biologische Forschung, Arzneimittelforschung und -entwicklung im Bereich Biotherapeutika und kleine Moleküle, Immunogenit?tsuntersuchungen, Impfstoffentwicklung und QC.

Diese biologischen Prozesse werden h?ufig mithilfe zweier kalorimetrischer Verfahren untersucht: der Isothermale Titrationskalorimetrie (ITC) und der Dynamischen Differenzkalorimetrie (DDK).

Die Mikrokalorimetrie erfordert keine Markierung und eine nur minimale Assay-Entwicklung. Sie ist komfortabel, schnell und auch für trübe und gef?rbte L?sungen geeignet.

  • Mit der Isothermale Titrationskalorimetrie (ITC) kann die Quantifizierung der Bindungsaffinit?t (KD), Bindungsst?chiometrie (n), Enthalpie (ΔH) und Entropie (ΔS) in einem einzigen Experiment erfolgen. Sie erm?glicht die Aufkl?rung des Bindungsmechanismus und die Bestimmung von Enzymkinetiken. Anhand der Daten k?nnen die Zielaktivit?t, die Hitvalidierung und die Leitstrukturoptimierung beurteilt werden.
  • Mit der Dynamischen Differenzkalorimetrie (DDK) k?nnen neben der thermalen Stabilit?t (Tm) auch Aspekte wie die richtige Faltung, die Homogenit?t und die thermische Stabilit?t von Proteinen beurteilt werden. Anhand dieser wichtigen Informationen k?nnen z.?B. die Herstellbarkeit und die optimale Formulierung bewertet werden.

MicroCal DSC Linie

MicroCal ITC Linie

MicroCal DSC Linie MicroCal ITC Linie

Hochwertige Proteinstabilitätsanalysen im regulierten Umfeld

Bestimmung der Bindungsparameter von Biomolekülen in einer einzigen Analyse

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Typ der Messung
Markierungsfreie Analyse
Technologie
Dynamische Differenzkalorimetrie (DSC)
Isothermale Titrationskalorimetrie (ITC)
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